在物理化学中，按照亥姆霍兹的定容自由能F与吉布斯的定压自由能G的定义，G=A+PV （P为压力，V为体积）。在生物的反应中，因为△（PV）可以忽略不计，所以两者是相同的。只有这样，A的变化△A=△U-T△S才成为主要讨论的问题（U、T、S分别是该系统的内能、绝对温度、熵）。△A给出了生物反应中释放出来可用于做功的能量上限。其变化量（一般用△G*表示）在生物学上使用时必须注意下列事项：⑴水的活度，可随意设为1.0进行计算：⑵因[H+]=1M并不符合实际情况，一般认为[H+]=10^(-7) M（pH=7），为了区别其符号写成△G0′；⑶例如反应，因各种成分并非标准浓度（1M），把实际浓度代入下式后其值△G′就有问题了；⑷在共轭反应中，要注意各种成分反应的变化量之和；⑸把△G0改为用平衡常数[1]  （Keq）表示，往往是很有用的。